添加時間:2022-09-02 12:28 瀏覽次數(shù): 來源:移動PCR實驗室
PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度極高,極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性,移動PCR實驗室如何避免以及處理實驗室污染?
移動PCR實驗室污染分類:樣本間交叉污染,主要是在采(取)樣的過程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過程中,由于移液器、離心管等使用不當導致的污染。PCR試劑的污染,主要是在PCR試劑配制過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染??寺≠|粒的污染,在實驗室操作中經常會用到陽性參考品,這些陽性參考品大多數(shù)是由某些克隆質粒制作而成,克隆質粒在單位容積內濃度高,不小心使用極易造成污染。PCR擴增產物污染.這是PCR反應中最主要最常見的污染問題。因為PCR產物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產物污染,就可造成假陽性結果。還有一種容易忽視,最可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠,據(jù)計算一個氣溶膠顆??珊?.8萬拷貝,因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。
移動PCR實驗室消除污染的操作步驟:購買噴壺(能夠噴出霧狀水汽的即可);有效氯消毒片,根據(jù)要求配制不同濃度的消毒液,或者購買成品次氯酸鈉消毒液配制合適濃度消毒水;核酸氣溶膠污染清除劑。無紡布/無塵紙等。
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